Como eu faço Qualidade: Limite Inferior do Intervalo Reportável

1- Introdução
A Norma PALC 2025 define o intervalo reportável como o intervalo dentro do qual é
possível obter e liberar resultados confiáveis de um analito em um determinado
sistema analítico. É preciso definir os limites inferior e superior do Intervalo Reportável
na documentação do analito e do sistema analítico, gerando laudos com resultados
comprovadamente contidos no intervalo. Abordamos aqui o limite inferior do
resultado reportável.

2- Limite Inferior de Detecção (LoD)
Segundo o documento EP17-A2 do CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute),
o LoD (Limit of Detection) ou LLD (Lower Limit of Detection), é definido como:
“A menor quantidade de analito em uma amostra que pode ser detectada, com um
grau de confiança estatisticamente aceitável, mas não necessariamente quantificada
como um valor exato.”

Explicando melhor:
O LoD representa o ponto no qual um resultado do teste pode ser diferenciado dos
valores de um branco (material com ausência do analito), com uma determinada
probabilidade de erro (geralmente 5%). Não significa que o resultado seja confiável
para quantificação, apenas sinaliza para a possibilidade de presença do analito.

No EP17-A2, a LoD é determinada com base em:
1. Limite de detecção no branco (LoB) – avaliado com materiais ou amostras sem
o analito.
2. Variabilidade da medição em concentrações baixas – usando amostras com
baixa concentração conhecida do analito.
A fórmula mais comumente usada é:

Onde:
• LoB = Limito of Blank (Limite do Branco)
• c = constante associada à confiança desejada (geralmente 1,645 para 95%)
• SD = desvio padrão da amostra de baixa concentração
Exemplo prático: Determinação do LoD para um teste de dosagem de proteína no
soro

Passo 1: Determinar o LoB (Limit of Blank)
Mensurar 20 replicatas de amostras de branco (sem analito) e obter:
• Média dos resultados do branco: 0,02 mg/dL
• Desvio padrão do branco: 0,01 mg/dL
Usando a fórmula:

Passo 2: Determinar o LoD (Limit of Detection)
Mensurar uma amostra com baixa concentração conhecida da proteína, próxima ao
que se espera como limite de detecção (por exemplo, 0,05 mg/dL), repetindo 20 vezes.
• Desvio padrão da amostra de baixa concentração: 0,015 mg/dL
Aplicando a fórmula:

Interpretação:
O LoD é 0,0611 mg/dL, ou seja, qualquer amostra com valor inferior a este não pode
ser diferenciada com segurança de um branco. Valores acima disso sugerem presença
da proteína, mas não necessariamente em concentração quantificável com precisão.

Aqui está o gráfico comparando as medições das amostras “Branco” das amostras com
pequena concentração. As linhas pontilhadas indicam o LoB (laranja) e o LoD
(vermelha), ajudando a visualizar onde está o limite de detecção.

3- Limite de Quantificação (LoQ)
Segundo o documento CLSI EP17-A2, o Limite de Quantificação (Limit of Quantitation,
ou LoQ) é definido como:
“A menor concentração de analito que pode ser quantificada com precisão e exatidão
aceitáveis, sob condições específicas de ensaio.”
O que isso significa na prática?
Diferente do LoD (que apenas indica a presença do analito), o LoQ é o ponto a partir
do qual os resultados são confiáveis para uso quantitativo. Ou seja:
• Resultados abaixo do LoQ: podem indicar a presença do analito, mas não são
confiáveis para quantificar com boa precisão.
• Resultados acima do LoQ: têm erro (precisão e viés) dentro de limites
aceitáveis definidos pelo fabricante ou pelo responsável pelo estudo.
Como o LoQ é determinado?
Geralmente, através de análises repetidas em pequena concentração e avaliando:
• Precisão (imprecisão, como CV %)
• Bias ou Viés (diferença entre valor medido e valor verdadeiro)
O LoQ é a menor concentração na qual esses dois critérios ficam dentro dos limites
aceitáveis pré-definidos. Por exemplo:
• Imprecisão ≤ 20% CV
• Viés ≤ 10%
Exemplo:
Se, ao medir 0,07 mg/dL de uma substância 20 vezes, você obtém:
• Média: 0,069 mg/dL
• CV: 15%
• Viés: -1,4%
Se esses valores estiverem dentro dos critérios aceitáveis, então 0,07 mg/dL pode ser
considerado o LoQ do método ou sistema analítico.

Aqui está o gráfico mostrando a imprecisão (%CV) em diferentes concentrações do
analito. A linha vermelha marca o limite aceitável de 20% de CV, e a linha laranja indica
onde a imprecisão cruza esse limite — estimando o LoQ em cerca de 0,06 mg/dL.

4- Conclusão
O intervalo reportável representa a faixa de concentrações na qual o sistema analítico
quantitativo fornece resultados acurados e confiáveis para um determinado analito. É
essencial que os fabricantes determinem ou que os laboratórios clínicos verifiquem ou
validem esse intervalo, para garantir a qualidade dos resultados emitidos. Ao
definirmos o limite inferior do Intervalo Reportável de um método quantitativo, o
parâmetro mais adequado é o Limite de Quantificação (LoQ).

5- Referências
1- PALC. Norma versão 2025
2- CLSI EP17 – A2. Evaluation of Detection Capability for Clinical Laboratory
Measurement Procedures, 2nd Edition
3- LLM ChatGPT 4o